TP 8 : Chromatographie

Objectif Nous allons vérifier que l'arôme extrait de l’écorce d’orange contient du limonène. Nous utilisons la méthode de la chromatographie sur couche mince (CCM).

Matériel : Plaques CCM, cuve, piques à apéritif, éluant, produits du TP précédent, limonène, extrait d’écorce d’orange, arôme naturel d’orange, solution de permanganate de potassium à 0, 1 mol.L^-1,

I. Principe de la chromatographie

En s’aidant du livre, donner la définition de la chromatographie

II. Expérience

Montrons que le limonène est présent dans l’extrait d’écorce d’orange

1. Préparation de la cuve

Verser le liquide appelé élua.nt dans la cuve (environ 1 cm). Fermer la cuve.

1.1 Quel est le rôle de l’éluant ?

1.2 Quels sont les critères pour choisir un éluant ? (Les espèces chimiques déposées sur la plaque doivent elles être solubles dans l’éluant ?)

2. Plaques de CCM

· La couche d'adsorbant est fragile, Ne pas mettre les doigts sur les plaques. Manipuler avec des gants

· Tracer un léger trait de crayon parallèle au bord inférieur de la plaque à une distance de 1,5 cm.

Les produits seront déposés sur cette ligne et espacés régulièrement. Dessiner 4 traits au crayon sur la ligne de dépôts.

2.1 La plaque est constituée d’une plaque d’aluminium recouverte de silice. Qu’est ce que la silice ?

2.2 Quel est le rôle de la plaque de silice ?

3. Dépôt des espèces chimiques sur la plaque

Chaque substance ou mélange doit être déposé en solution diluée, sinon la silice se sature et les taches obtenues se retrouvent sous forme de traînées et sont donc mal séparées.

Sur la paillasse du professeur il y a 4 petits béchers contenant respectivement:

Dépôt A: Limonène dilué dans du cyclohexane.

Dépôt B : Extrait d’écorce d’orange dissous dans le cyclohexane.

Dépôt C : Arôme d’orange « Vahiné » dissous dans le cyclohexane

Dépôt D : Citral dilué dans du cyclohexane

. Pour déposer une petite quantité de solution en un point précis, on utilise des « piques à apéritif » dont le bout a été légèrement écrasé.

· Déposer la solution pendant une durée très brève afin d'éviter l'étalement du dépôt.

· Ne pas trop appuyer, pour ne pas détériorer la couche d'adsorbant.

· Bien sécher la plaque avant élution (sèche-cheveux) de manière à ce que le solvant des dépôts soit entièrement évaporé.

· Refaire l’opération 5 fois pour chaque dépôt

Montrer la plaque au professeur

4. Elution

· Disposer la plaque dans la cuve, vérifier que les dépôts sont au dessus du niveau de l'éluant.

· Ne pas toucher la cuve pendant l'élution.

4.1 Pourquoi les dépots doivent ils être alignés au dessus du niveau de l’éluant ?

4.2 Pourquoi l’éluant monte-t-il dans la plaque ? Comment s’appelle ce phénomène ?

4.3 Compléter le schéma ci-dessous.

4.4 Comparer le déplacement sur la plaque d’une espèce soluble dans l’éluant et d’une autre espèce peu soluble dans l’éluant

· Quand le front de l'éluant arrive à 1 cm du bord supérieur retirer doucement la plaque marquer au crayon le niveau atteint par le front de l'éluant (Hauteur H). Sécher la plaque à l'air ou éventuellement au sèche-cheveux pour évaporer entièrement l’éluant

Montrer la plaque au professeur

5. Révélation

Si les constituants sont colorés, ils sont directement visibles sur la plaque.

Dans notre cas la révélation se fait sous la lampe à UV ou dans une solution de permanganate de potassium

· Plonger la plaque dans la solution de permanganate de potassium et la retirer aussitôt.

· Sécher la plaque au sèche‑cheveux Entourer les taches au crayon de papier.

5.1 Que représentent les taches observées sur la plaque ?

5.2 Identifier le limonène dans l’extrait d’orange.

5.3 Retrouve-t-on du limonène dans l’extrait d’arôme d’orange « Vahiné » ?

5.4 Représenter les dépôts sur la plaque après la révélation. Conclure.

Fin de la séance remise en état du poste de travail, récupération des produits.